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西安工程大學樊威/清華大學張瑩瑩《Adv. Mater.》:全蠶絲基人造骨
2024-03-05  來源:高分子科技

  金屬及合金是目前骨外科手術中應用最為廣泛的材料,這是因為金屬相比較于陶瓷和聚合物來說,其機械性能高和耐腐蝕性能強。然而,美中不足的是,金屬與合金(~110 GPa)和人體骨(3~20 GPa)之間的彈性模量相差大,從而會發生應力屏蔽效應,對骨骼結構造成壓力,進而導致金屬植入物的松動和最終失效。此外,金屬植入物可能會引起機體免疫反應而增加感染風險并減緩傷口愈合,而且其植入體內難以降解,通常需要進行二次手術取出。


  蠶絲作為一種天然的蛋白質高分子材料,具有優良的生物相容性、生物降解性、加工性和低廉的成本,廣泛應用于外科縫合線、人造皮膚、肌肉、血管、骨骼等生物醫學領域。更重要的是蠶絲的楊氏模量8.9~17.4 GPa和密度1.3~1.4 g/cm3比金屬基或陶瓷基人造骨更接近人骨3~20 GPa, 1.8~2.0 g/cm3)。


  為此西安工程大學樊威教授團隊與清華大學張瑩瑩教授團隊巧妙地利用了蠶絲(Silk II結構)與絲素(Silk I結構)之間結晶度的差異,脫膠蠶絲織物再生絲素熱壓制備了一種絲素自增強復合材料SFS)。在高壓和高溫下,材料的自由能變化(吉布斯自由能G=U+PV-TS)可使材料中的相或分子結構發生改變。在熱壓過程中,具有超低β片含量的再生絲素通過氫鍵、范德華力和靜電力與蠶絲織物發生重排、自組裝并緊密結合在一起。蠶絲織物和再生絲素同為絲素蛋白,因此,兩者之間形成了幾乎完美的界面結合狀態,具有優異的力學性能。SFS通過調整增強體結構與基體的比例,可以定制其力學性能和密度,以適應人體不同部位骨植入的要求。更重要的是,SFS具有促進成骨細胞增殖和提高成骨細胞活性的能力,并且可隨著骨愈合在體內逐漸降解,無需二次手術切除,避免了患者的二次疼痛,節省了醫療費用。可以說本工作是利用最便宜的材料(蠶絲)做了最昂貴的事情(人造骨)。


  圖1SFS的加工過程與樣品。首先將蠶絲纖維進行脫膠、溶解、透析、冷凍干燥、研磨等工序得到再生絲素粉末,然后將再生絲素粉末與脫膠后的蠶絲織物進行鋪層和熱壓,最終得到SFSSFS具有優異的可加工性能,可以加工成螺釘、內接骨板等任意形狀。 


全蠶絲基人造骨的制備及形貌 


全蠶絲基人造骨的表征及成型機理


  如圖2所示,TGDSC確定了絲素的熱壓溫度范圍(圖2a-b),通過拉曼、XRDFTIR分析可以發現在熱壓前后絲素結晶和構相的轉變(圖2c-f)。XPS分析表明在熱壓前后SFS并未生成新的化學鍵(2g-j)。最后揭示了絲素之間是通過氫鍵作用、范德華力和靜電吸附而緊密結合在一起的,進而形成了界面性能優異的SFS(圖2k)。 


全蠶絲基人造骨的力學性能


  如圖3所示,SFS的拉伸強度最高為106.5 MPa,彎曲強度最高為234.4 MPa(圖3a-b)。SFS的韌性范圍1.0-12.8 MJ/m3(圖3cSFS的力學性能與TC4鈦合金相比更接近人體皮質骨,滿足骨折部位固定的需求,且不會產生應力屏蔽作用(圖3d)。SFS截面的納米壓痕(圖3e-fAFM(圖3g-i測試表明復合材料的剛度從纖維到基體逐漸下降,而不是在界面處急劇下降。梯度界面層有助于將應力從基體傳遞到纖維增強體,進一步提高復合材料的機械性能,這也是SFS具有優異機械性能的原因所在。 


全蠶絲基人造骨力學性能的有限元模擬


  如4所示,Abaqus軟件中建立了SFS的代表體積單元RVE)模型(圖4a)。界面的100L SFS有限元模擬的拉伸強度(120.5 MPa)比實驗值(114.8 MPa)大5.0%,而有界面的100L SFS有限元模擬的拉伸強度(101.3 MPa)比實驗值低11.8%這說明界面性能不佳會降低復合材料的機械性能(圖4b當界面完美時,SFS的主要破壞模式是纖維和基體的破壞。當SFS被拉伸時,應力主要集中在其中部(圖4c。將界面引入模型后,界面脫粘成為SFS失效的主要原因。應力集中在纖維和基體的交界處。界面結合不良的區域更容易發生分層破壞,導致SFS整體損壞(圖4dSFS的拉伸破壞形貌進一步證實了上述觀點(圖4e-g)。 


全蠶絲基人造骨的體外成骨性能


  如圖5所示,細胞粘附在三種支架表面,100L SFS純再生絲素(RS bulk上的細胞偽足數量相較于TC4鈦合金支架表面的數量更多(圖5a-c,且具有顯著性差異(5p。免疫熒光DAPI染色結果顯示,100L SFSRS bulkTC4鈦合金上粘附的MC3T3-E1細胞數量逐步增加,且100L SFSRS bulk支架上的細胞增殖情況更盛(圖5d-i)。從活細胞/死細胞的染色結果可以看出,100L SFSRS bulk的細胞存活率和細胞存活數明顯高于TC4鈦合金(圖5j-o100L SFS支架上MC3T3-E1細胞的ALP活性明顯高于TC4鈦合金和對照組(圖5q)。100L SFS支架上的鈣鹽沉積量也明顯高于RS bulkTC4鈦合金和對照組(圖5r)。100L SFS支架上MC3T3-E1細胞ALP(圖5s)、OCN(圖5t)和RUNX2(圖5u)的表達顯著高于其他三組,表明100L SFS在促進成骨分化方面更具優勢。 


全蠶絲基人造骨的體外生物降解和體內生物相容性


  如圖6所示,體外降解30天后SFS的殘留質量比為RS bulk > 100L > 50L > 15L > 165L SFS6a-c),這表明SFS的降解速率可以通過調節真絲織物的含量來調節。隨著織物含量的增加,SFS內部會形成多個界面,降解溶液沿著界面通道進入SFS,導致降解加速(圖6d)。經過定位、鉆孔、植入和縫合后,將其植入新西蘭兔的股骨遠端(圖6e-f)。顯微CT成像顯示,SFS釘在4周后仍完好無損地留在股骨內(圖6g)。染色硬組織切片顯示,SFS周圍形成了新的骨結構,且沒有產生炎癥反應(圖6h6i)。


  SFS不但具有可控的力學性能、優異的生物相容性、成骨性和生物降解性,而且其原材料和加工過程成本很低,因此,SFS具有取代傳統金屬或陶瓷植入物的巨大潛力。


  該工作以Silk-fabric reinforced silk for artificial bones為題發表在《Advanced Materials上。第一作者為西安工程大學碩士研究生陸琳琳,共同第一作者為西北工業大學劉旭慶教授通訊作者為西安工程大學樊威教授,共同通訊作者為清華大學張瑩瑩教授,合作者包括西安交通大學王淑娟副教授西安交通大學第一附屬醫院劉儉濤博士,南京林業大學葛省波副教授西安工程大學魏同學高級工程師,西安工程大學碩士研究生孫巖、張海洋、蘇金輝該工作得到國家自然科學基金、陜西省杰出青年科學基金、陜西省高校青年創新團隊與西安市中心醫院項目的支持。


  文章鏈接:https://doi.org/10.1002/adma.202308748

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(責任編輯:xu)
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