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山東大學劉國棟、趙建 CEJ:以木質纖維素水解液為原料的纖維素酶現場生產策略
2023-12-28  來源:高分子科技

  纖維素酶系的高效、低成本生產是降低木質纖維糖生產成本,促進木質纖維素生物轉化進入商業化生產的關鍵環節。經典的纖維素酶發酵生產工藝依賴乳糖、槐糖、纖維素等誘導物的添加,原料成本高且發酵過程的調控難度大。直接以預處理秸稈等原料為碳源和誘導物的整合現場產酶integrated on-site enzyme production)策略有利于節省成本,但存在固體原料補料難度大、產酶水平低等缺點,難以大規模實施。


以木質纖維素水解液為原料的纖維素酶現場生產策略


  針對上述難題,山東大學微生物技術國家重點實驗室劉國棟副教授、趙建教授研究團隊提出了以木質纖維素水解液為原料的新型整合現場產酶策略。首先,通過重塑纖維素酶轉錄調控模式,構建了能夠以葡萄糖為唯一碳源發酵生產纖維素酶的菌株,并通過蛋白質組手段證實其在葡萄糖培養基中能夠有效表達主要纖維素酶和半纖維素酶組分;進一步通過表達異源b-葡萄糖苷酶,顯著提升了整個酶系的糖化效率。利用工程菌株生產的粗酶液和間歇補料水解工藝,水解預處理玉米秸稈,獲得了葡萄糖濃度為166.67 g/L的秸稈糖液。利用該秸稈糖液替代淀粉來源的葡萄糖作為培養基,在5 L發酵罐上采用補料發酵工藝生產纖維素酶,發酵液的濾紙酶活力可達到60.4 U/ml,且該酶液的糖化效率高于使用淀粉糖進行補料發酵生產出的酶液的糖化效率。基于上述結果,提出了使用木質纖維素轉化系統內部的水解液進行閉環現場產酶的策略。當以汽爆-亞硫酸銨預處理并經水洗的玉米秸稈為原料時,用于產酶的水解液僅占全部水解液的3.1%。該研究為纖維素酶現場生產中兼顧原料成本與發酵水平提供了一種新的解決方案。 


2 重塑纖維素酶轉錄調控模式實現以葡萄糖為唯一碳源發酵生產纖維素酶 


圖3 工程菌株能夠以葡萄糖為唯一碳源生產主要纖維素酶和半纖維素酶組分
 

圖4 以秸稈水解液為原料補料發酵生產酶液的糖化效率高于以淀粉糖為原料生產出的酶液

  該研究以“A closed-loop strategy for on-site production of saccharolytic enzymes for lignocellulose biorefinery using internal lignocellulosic hydrolysates”為題發表于化工領域期刊Chemical Engineering Journal。博士研究生趙芹芹張政為論文的共同第一作者,劉國棟副教授和趙建教授為論文的通訊作者,山東大學微生物技術國家重點實驗室為第一完成單位和通訊作者單位。研究得到了國家重點研發計劃、國家自然科學基金等項目的支持。


  原文免費下載鏈接:https://authors.elsevier.com/a/1iK6Z4x7R2gYXR

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